科研人员从云杉卷叶蛾越冬幼虫中分离出一种超强的抗冻活性基因sbwAFP，并导入番茄植株中，使番茄植株获得抗冻性，下图表示重组质粒的构建和筛选过程。请回答下列问题：（AmpF为氨苄青霉素抗性基因，TetF为四环素抗性基因）
（1）对获得的sbwAFP基因通常用 技术以扩增数量。分析图示，构建重组质粒时，应选择限制酶 和 切割目的基因和质粒。
（2）将重组质粒导入大肠杆菌前，应用 处理大肠杆菌以制备感受态细胞，为了筛选将重组质粒，可将大肠杆菌分别在含有四环素和氨苄青霉素的培养基中培养，成功导入重组质粒的大肠杆菌在两种培养基的生长状况为 。
（3）将成功导入了目的基因的番茄细胞培育成完整植株幼苗所采用的技术是 ，从细胞的角度分析，所依据的生物学原理是 。
（4）如何从个体水平检测目的基因是否成功表达？ 。
答案
(1)PCR(多聚酶链式反应）（2分） Bgl II( 2分） Cla I( 2分）
(2)钙离子(Ca2+ )(1分） 在含氨苄青霉素的培养基上能正常生长,在含四环素的培养基上不能正常生长( 2 分)
(3)植物组织培养(2分） 植物细胞的全能性(2分）
(4)将番茄植株置于冷冻的环境下，观察其是否能正常生长发育(2分）
