抗虫和耐除草剂玉米双抗 12-5 是我国自主研发的转基因品种。为给监管转基因生物安全提供依据，采用 PC 方法进行目的基因监测，反应程序如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A ．预变性过程可促进模板 DNA 边解旋边复制
B ．后延伸过程可使目的基因的扩增更加充分
C ．延伸过程无需引物参与即可完成半保留复制
D ．转基因品种经检测含有目的基因后即可上市
【收录时间】
2022-11-10
【知识点】
DNA和蛋白质技术
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B
【分析】 PCR 过程为： ① 变性，当温度上升到 90℃ 以上时，氢键断裂，双链 DNA 解旋为单链； ② 复性，当温度降低到 50℃ 左右是，两种引物通过碱基互补配对与两条单链 DNA 结合； ③ 延伸，温度上升到 72℃ 左右，溶液中的四种脱氧核苷酸，在 DNA 聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的 DNA 链。
【详解】 A 、预变性是使引物完全变性解开， A 错误；
B 、后延伸过程后延伸是为了让引物延伸完全并让单链产物完全退火形成双链结构，可使目的基因的扩增更加充分， B 正确；
C 、延伸过程需引物参与， C 错误；
D 、转基因品种不只需要检测是否含有目的基因，还要检测是否表达，还有安全性问题， D 错误；
故选 B 。
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2022-11-10
选择题
偏难
hushuiqing
考点梳理：
根据可圈可点权威老师分析，试题 "
抗虫和耐除草剂玉米双抗12-5是我国自主研发的转基因品种。为给监管转基因生物安全提供依据，采用PC方法进行目的基因监测，反应程序如图所示。下列叙述正确的是（）A．预变性过程可促进模板DNA边解旋边复制
" 主要考察你对
多聚酶链式反应扩增DNA片段
等考点的理解。关于这些考点的"梳理资料"如下:
◎ 多聚酶链式反应扩增DNA片段的定义
多聚酶链式反应扩增DNA片段：
1、PCR原理：在解旋酶作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4中游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。
2、PCR反应过程是：变性→复性→延伸
3、结果：上述三步反应完成后，一个DNA分子就变成了两个DNA分子，随着重复次数的增多，DNA分子就以2n的形式增加。PCR的反应过程都是在PCR扩增仪中完成的。
1、PCR原理：在解旋酶作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4中游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。
2、PCR反应过程是：变性→复性→延伸
| 过程 | 说明 | 图解 |
| 变性 | 当温度上升到90℃以上时，双链DNA解聚为单链 |  |
| 复性 | 温度下降到50℃左右，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合 |  |
| 延伸 | 72℃左右时，TaqDNA聚合酶有最大活性，可使DNA新链由5'端向3'端延伸 |  |
3、结果：上述三步反应完成后，一个DNA分子就变成了两个DNA分子，随着重复次数的增多，DNA分子就以2n的形式增加。PCR的反应过程都是在PCR扩增仪中完成的。
◎ 多聚酶链式反应扩增DNA片段的知识扩展
（1）PCR原理：在解旋酶作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4中游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。
（2）PCR反应过程是：变性→复性→延伸
在升温至90℃以上时DNA解旋；在降温至50℃左右时引物与DNA单链结合；在升温至72℃左右时合成DNA子链。
（3）DNA分子复制的人工控制
解开螺旋：在80～100℃时，DNA双螺旋打开，形成两条DNA单链，称为变性。
恢复螺旋：在50～60℃左右时，两条DNA单链重新形成双螺旋结构，称为复性。
复制条件：缓冲液，DNA模板、四种脱氧核苷酸、热稳定DNA聚合酶、两种引物。
控制仪器：PCR仪（温度周期性自动调节仪）。
（4）PCR的含义是多聚酶链式反应。
（5）PCR技术反应的条件：①稳定的缓冲溶液环境；②DNA模板；③合成引物；④四种脱氧核甘酸；⑤DNA聚合酶；⑥温控设备
（6）PCR技术最突出的优点是快速、高效、灵活、易于操作。
TaqDNA聚合酶的特点是：耐高温。
（2）PCR反应过程是：变性→复性→延伸
在升温至90℃以上时DNA解旋；在降温至50℃左右时引物与DNA单链结合；在升温至72℃左右时合成DNA子链。
（3）DNA分子复制的人工控制
解开螺旋：在80～100℃时，DNA双螺旋打开，形成两条DNA单链，称为变性。
恢复螺旋：在50～60℃左右时，两条DNA单链重新形成双螺旋结构，称为复性。
复制条件：缓冲液，DNA模板、四种脱氧核苷酸、热稳定DNA聚合酶、两种引物。
控制仪器：PCR仪（温度周期性自动调节仪）。
（4）PCR的含义是多聚酶链式反应。
（5）PCR技术反应的条件：①稳定的缓冲溶液环境；②DNA模板；③合成引物；④四种脱氧核甘酸；⑤DNA聚合酶；⑥温控设备
（6）PCR技术最突出的优点是快速、高效、灵活、易于操作。
TaqDNA聚合酶的特点是：耐高温。
◎ 多聚酶链式反应扩增DNA片段的知识对比
细胞被DNA复制与PCR技术的比较：
| 细胞内DNA复制 | 体外DNA扩增（PCR） | ||
| 不同点 | 解旋 | 在解旋酶作用下边解旋边复制 | 80～100℃高温解旋，双链完全分开 |
| 酶 | DNA解旋酶、DNA聚合酶 | TaqDNA聚合酶 | |
| 引物 | RNA | DNA、RNA | |
| 温度 | 体内温和条件 | 高温 | |
| 相同点 | ①需提供DNA模板 ②四种脱氧核苷酸为原料 ③子链延伸的方向都是从5'端到3'端 | ||
◎ 多聚酶链式反应扩增DNA片段的知识点拨
知识点拨：
1、DNA分子复制的人工控制
解开螺旋：在80～100℃时，DNA双螺旋打开，形成两条DNA单链，称为变性。
恢复螺旋：在50～60℃左右时，两条DNA单链重新形成双螺旋结构，称为复性。
复制条件：缓冲液，DNA模板、四种脱氧核苷酸、热稳定DNA聚合酶、两种引物。
控制仪器：PCR仪（温度周期性自动调节仪）。
2、PCR的含义是多聚酶链式反应。
3、PCR技术反应的条件：①稳定的缓冲溶液环境；②DNA模板；③合成引物；④四种脱氧核甘酸；⑤DNA聚合酶；⑥温控设备
4、PCR技术最突出的优点是快速、高效、灵活、易于操作。
5、TaqDNA聚合酶的特点是：耐高温。
1、DNA分子复制的人工控制
解开螺旋：在80～100℃时，DNA双螺旋打开，形成两条DNA单链，称为变性。
恢复螺旋：在50～60℃左右时，两条DNA单链重新形成双螺旋结构，称为复性。
复制条件：缓冲液，DNA模板、四种脱氧核苷酸、热稳定DNA聚合酶、两种引物。
控制仪器：PCR仪（温度周期性自动调节仪）。
2、PCR的含义是多聚酶链式反应。
3、PCR技术反应的条件：①稳定的缓冲溶液环境；②DNA模板；③合成引物；④四种脱氧核甘酸；⑤DNA聚合酶；⑥温控设备
4、PCR技术最突出的优点是快速、高效、灵活、易于操作。
5、TaqDNA聚合酶的特点是：耐高温。
◎ 多聚酶链式反应扩增DNA片段的知识拓展
知识拓展：
1、DNA含量的测定——分光光度法
2、DNA聚合酶不恩能够从头合成DNA，只能从DNA的3'端开始延伸DNA链，因此DNA复制需要引物。
1、DNA含量的测定——分光光度法
| 项目 | 说明 | |
| 原理 | DNA在260nm的紫外线波段有一强烈吸收峰，峰值大小与DNA的含量是正相关 | |
| 过程 | 稀释 | 2μLPCR反应液，加入98μL蒸馏水，即将样品进行50倍稀释 |
| 对照调零 | 以蒸馏水作为空白对照，在波长260nm处，将紫外分光光度计的赌注调节至零 | |
| 测量 | 取DNA稀释液100μL至比色杯中，测定260nm处的光吸收值 | |
| 计算 | DNA含量（μg/mL）=50×（260nm的读数）×稀释倍数 | |
◎ 多聚酶链式反应扩增DNA片段的教学目标
1、理解多聚酶链式反应扩增DNA片段的原理。
2、识记多聚酶链式反应扩增DNA片段的结果。
3、比较多聚酶链式反应扩增DNA片段 DNA复制的异同点。
2、识记多聚酶链式反应扩增DNA片段的结果。
3、比较多聚酶链式反应扩增DNA片段 DNA复制的异同点。
◎ 多聚酶链式反应扩增DNA片段的考试要求
能力要求：了解/识记
课时要求：1
考试频率：易考
分值比重：0.5
课时要求：1
考试频率：易考
分值比重：0.5