芽殖酵母属于单细胞真核生物。为寻找调控蛋白分泌的相关基因，科学家以酸性磷酸酶（ P 酶）为指标，筛选酵母蛋白分泌突变株并进行了研究。

(1) 酵母细胞中合成的分泌蛋白一般通过 作用分泌到细胞膜外。

(2) 用化学诱变剂处理，在酵母中筛选出蛋白分泌异常的突变株（ sec1 ）。无磷酸盐培养液可促进酵母 P 酶的分泌，分泌到胞外的 P 酶活性可反映 P 酶的量。将酵母置于无磷酸盐培养液中，对 sec1 和野生型的胞外 P 酶检测结果如下图。据图可知， 24℃ 时 sec1 和野生型胞外 P 酶随时间而增加。转入 37℃ 后， sec1 胞外 P 酶呈现 的趋势，表现出分泌缺陷表型，表明 sec1 是一种温度敏感型突变株。

(3)37℃ 培养 1h 后电镜观察发现，与野生型相比， sec1 中由高尔基体形成的分泌泡在细胞质中大量积累。由此推测野生型 Sec1 基因的功能是促进 的融合。

(4) 由 37℃ 转回 24℃ 并加入蛋白合成抑制剂后， sec1 胞外 P 酶重新增加。对该实验现象的合理解释是 。

(5) 现已得到许多温度敏感型的蛋白分泌突变株。若要进一步确定某突变株的突变基因在 37℃ 条件下影响蛋白分泌的哪一阶段，可作为鉴定指标的是：突变体 ______________ 。

A ．蛋白分泌受阻，在细胞内积累

B ．与蛋白分泌相关的胞内结构的形态、数量发生改变

C ．细胞分裂停止，逐渐死亡

答案

(1) 胞吐

(2) 先上升后下降

(3) 分泌泡与细胞膜

(4) 积累在分泌泡中的 P 酶分泌到细胞外

(5)B

【分析】 1 、大分子、颗粒性物质跨膜运输的方式是胞吞或胞吐。分泌蛋白是大分子物质，分泌到细胞膜外的方式是胞吐。

2 、分析题图可知， 24℃ 时 sec1 和野生型胞外 P 酶活性随时间增加而增强，转入 37℃ 后， sec1 胞外 P 酶从 18U.mg ^-1 上升至 20U.mg ^-1 ，再下降至 10U.mg ^-1 。

【详解】（ 1 ）大分子、颗粒性物质跨膜运输的方式是胞吞或胞吐，分泌蛋白属于大分子，分泌蛋白一般通过胞吐作用分泌到细胞膜外。

（ 2 ）据图可知， 24℃ 时 sec1 和野生型胞外 P 酶活性随时间增加而增强，转入 37℃ 后， sec1 胞外 P 酶从 18U.mg ^-1 上升至 20U.mg ^-1 ，再下降至 10U.mg ^-1 ，呈现先上升后下降的趋势。

（ 3 ）分泌泡最终由囊泡经细胞膜分泌到细胞外，但在 37℃ 培养 1h 后 sec1 中的分泌泡却在细胞质中大量积累，突变株 (sec1) 在 37℃ 的情况下，分泌泡与细胞膜不能融合，故由此推测 Sec1 基因的功能是促进分泌泡与细胞膜的融合。

（ 4 ） 37℃ 培养 1h 后 sec1 中由高尔基体形成的分泌泡在细胞质中大量积累， sec1 是一种温度敏感型突变株，由 37℃ 转回 24℃ 并加入蛋白合成抑制剂后，此时不能形成新的蛋白质，但 sec1 胞外 P 酶却重新增加，最合理解释是积累在分泌泡中的 P 酶分泌到细胞外。

（ 5 ）若要进一步确定某突变株的突变基因在 37℃ 条件下影响蛋白分泌的哪一阶段，可检测突变体中与蛋白分泌相关的胞内结构的形态、数量是否发生改变，哪一阶段与蛋白分泌相关的胞内结构的形态、数量发生改变，即影响蛋白分泌的哪一阶段， B 正确。

故选 B 。